تأثير البروبوليس البرازيلي (أف-08) على السمية الجينية، السمية الخلوية والموت النخاعي للمبيضات الهامستر الصينية (شو-K1) الخلايا irradiatedwith60Co أشعة غاماEffect of Brazilian propolis (AF-08) on genotoxicity, cytotoxicity andclonogenic death of Chinese hamster ovary (CHO-K1) cells irradiatedwith60Co gamma-radiation

تأثير البروبوليس البرازيلي (أف-08) على السمية الجينية، السمية الخلوية والموت النخاعي للمبيضات الهامستر الصينية (شو-K1) الخلايا irradiatedwith60Co أشعة غاما

Effect of Brazilian propolis (AF-08) on genotoxicity, cytotoxicity andclonogenic death of Chinese hamster ovary (CHO-K1) cells irradiatedwith60Co gamma-radiation

Geyza Spigoti Santosa,, Shigetoshi Tsutsumib, Daniel Perez Vieiraa,,Paolo Bartolinia,, Kayo Okazakia,

أجريت الدراسة الحالية لتقييم تأثير صمغ النحل  البرازيلي (أف-08؛ 5، 10، 15،
30، 50، 100، و 200 جم / مل) في حماية خلايا شو-K1 ضد الأضرار السامة والخلايا السامة للخلايا و
موت الناجم عن 60Co أشعة غاما (1.0، 2.0، 4.0، 6.0 غراي). لهذا الغرض، ثلاثة
تم تحليل نقاط النهاية المترابطة: تحريض تلف الحمض النووي عن طريق استخدام اختبار نواة صغيرة (من)
(الضرر السامة للخلايا)، بقاء الخلية عن طريق الفحص متس، والتلطيخ التفاضلي (الضرر السامة للخلايا)
والوفاة المستنسخة من خلال اختبار تشكيل المستعمرة (الضرر السامة للخلايا). كشف اختبار من أن  صمغ النحلر
وحدها (5-100 جم / مل) لم تسمم الجينات حتى 100 جم / مل وأن 30 جم / مل من  صمغ النحل خفضت
(~ 56٪ تخفيض، p <0.05)، مما يدل على تأثير واقية من الإشعاع على المشع
خلايا تشو-K1. من ناحية أخرى، أظهر تحليل السمية الخلوية أن تركيز 50 غ / مل
(P <0.001) عندما يرتبط مع الإشعاع، مما يقلل من
نسبة الخلايا النخرية (p <0.01). لم يتم العثور على تأثير سمية للخلايا بوساطة، ولكن تركيز
كان 200 غ / مل سامة عند تحليلها في 24 و 48 ساعة عبر تقنية تلطيخ التفاضلية، ولكن ليس في 72 ساعة
بعد التشعيع، وتحليلها مع الفحص متس. وأظهرت تلطيخ التفاضلية أيضا أن نخر كان
وطريقة الوفاة الرئيسية في الخلايا المشععة، وأن المستمدة تسببت فقط في تركيز سمية من
صمغ النحل (200 جم / مل). وفيما يتعلق بالقدرة المستنسخة، أظهر تركيز 50 غم / مل أيضا
تأثير كبير على تحفيز تكاثر الخلايا (p <0.001)، بالاتفاق مع البيانات من التفاضلية
تلطيخ. مجتمعة، وتشير هذه البيانات إلى أن استخدام  صمغ النحل أف-08 للوقاية من
والآثار السلبية للإشعاع المؤين واعدة. ومع ذلك، يلزم إجراء تحقيقات إضافية
من أجل فهم أفضل للتطبيقات المحتملة للدنج لتحسين صحة الإنسان.

b s t r a c t

Effect of Brazilian propolis (AF-08) on genotoxicity, cytotoxicity andclonogenic death of Chinese hamster ovary (CHO-K1) cells irradiatedwith60CoThe present study was conducted in order to evaluate the effect of Brazilian propolis (AF-08; 5, 10, 15,30, 50, 100, and 200 g/mL) in protecting CHO-K1 cells against genotoxic and cytotoxic damage andclonogenic death induced by60Co gamma-radiation (1.0, 2.0, 4.0, and 6.0 Gy). For this purpose, threeinterlinked endpoints were analyzed: induction of DNA damage by use of the micronucleus (MN) test(genotoxic damage), cell viability by means of the MTS assay, and differential staining (cytotoxic damage)and clonogenic death via the colony-formation test (cytotoxic damage). The MN test revealed that propo-lis alone (5–100 g/mL) was not genotoxic up to 100 g/mL and that 30 g/mL of propolis reduced theradiation-induced DNA damage (∼56% reduction, p < 0.05), exhibiting a radio-protective effect on irradi-ated CHO-K1 cells. On the other hand, analysis of cytotoxicity showed that a concentration of 50 g/mLpresented a significant proliferative effect (p < 0.001) when associated with radiation, decreasing thepercentage of necrotic cells (p < 0.01). No mediated cytotoxic effect was found, but the concentration of200 g/mL was toxic when analyzed at 24 and 48 h via the differential staining technique, but not at 72 hafter irradiation, analyzed with the MTS assay. Differential staining also showed that necrosis was themain death modality in irradiated cells and that apoptosis was induced only at the toxic concentration ofpropolis (200 g/mL). Concerning the clonogenic capacity, a concentration of 50 g/mL also exhibited asignificant stimulating effect on cell proliferation (p < 0.001), in agreement with the data from differen-tial staining. Taken together, these data suggest that the use of propolis AF-08 for the prevention of theadverse effects of ionizing radiation is promising. Nevertheless, additional investigations are necessaryfor a better understanding of potential applications of propolis to improve human health.