تقييم قابلية نحل العسل، 4_pism إليفيرا، سبيرم باستخدام الفلورسنت المتبقيVIABILITY ASSESSMENT OF HONEY BEE, ?4_pism ellifera, SPERM USING DUAL FLUORESCENT STAINING

تقييم قابلية نحل العسل، 4_pism إليفيرا، سبيرم باستخدام الفلورسنت المتبقي

VIABILITY ASSESSMENT OF HONEY BEE, ?4_pism ellifera
SPERM USING DUAL FLUORESCEVIABILITY ASSESSMENT OF HONEY BEE, apis mellifera,spirm using dual fluriscent stainingNT STAINING
A. M. Collins’” and A. M. Donoghue

نذ تطوير التلقيح الآلي من نحل العسل (أنيس مليفر @
الملكات في 193Os، كان هناك اهتمام في التقييم والتخزين في المختبر
المني. العديد من البقع الفلورية، عند استخدامها في الجمع، وقد استخدمت على نحو فعال
لتقييم قابلية الحيوانات المنوية في أنواع الثدييات والطيور. وكانت أهدافنا لاختبار
اثنين من مجموعات من 1ive: البقع الفلورية الميتة، سيبر-14 مع يوديد بروبيديوم (بي)،
أو كالسين-آم مع بي، والتحقق من صحة استخدام هذه التحقيقات مع الحيوانات المنوية نحل العسل.
سيبر-14 هو وصمة عار النووية المنتجة مضان الأخضر من الحمض النووي في الحيوانات المنوية الحية،
كالسين-آم هو غشاء الركيزة إيستراس تتخلل غشاء تلوين كامل الحيوانات المنوية الخضراء، و
بي هو وصمة عار خلية ميتة التقليدية إعطاء اللون الأحمر المتناقضة. كل بقع حية
الحيوانات المنوية فلوريسد النحل، ولكن سيبر-14: بي أنتج تمييزا أكثر وضوحا بين
الحيوانات المنوية الحية والميتة. سلسلة تخرج من 1 المعروفة: كانت نسب الحيوانات المنوية الميتة
تستخدم للتحقق من صحة البقع لتحديد قابلية الحيوانات المنوية في نحل العسل.
بوميشد، بجانب، إلسوير، سسينس، إنك.

ABSTRACT
Since the development of instrumental insemination of honey bee (Anis mellifer@
queens in the 193Os, there has been interest in the evaluation and in vitro storage of
semen. Several fluorescent stains, when used in combination, have been effectively used
to assess sperm viability in mammalian and avian species. Our objectives were to test
two combinations of 1iving:dead fluorescent stains, SYBR-14 with propidium iodide (PI),
or Calcein-AM with PI, and validate the use of these probes with honey bee sperm.
SYBR-14 is a nuclear stain producing green fluorescence of the DNA in living sperm,
Calcein-AM is a membrane-permeant esterase substrate staining entire sperm green, and
PI is a traditional dead cell stain giving a contrasting red color. Both living stains
fluoresced bee sperm, but the SYBR-14:PI produced a clearer distinction between the
living and dead sperm. A graduated series of known 1iving:dead sperm proportions was
used to validate the accuracy of the stains for determining sperm viability in honey bees.
PuMished by Elswier Science inc.
Key words: semen, viability, nuclear stain, spermatozoa, instrumental insemination