رواية الذهب القائم على مقايسة النانوية ل الكشف السريع عن مليسوكوكوس بلوتونيوس، و العامل المسبب للفولبرو الأوروبي A novel gold nanoparticles-based assay for rapid detection of Melissococcus plutonius, the causative agent of European foulbrood

رواية الذهب القائم على مقايسة النانوية ل
الكشف السريع عن مليسوكوكوس بلوتونيوس، و
العامل المسبب للفولبرو الأوروبي

ملخص

تعفن الحضنة  الأوروبي (إف) هو مرض  بكتيري  حاد يصيب نحل العسل (أبيس مليفيرا)

و التي تسببها مليسوكوكوس بلوتونيوس. ويستند تشخيص إف في الميدان على التفتيش البصري من أمشاط الحضنة والكشف عن اليرقات المريضة. ومع ذلك، قد تكون أعراض إف بسهولة تحجبها أمراض أخرى أو تشوهات في الحضنة، مما يجعل التشخيص النهائي صعب. وبالتالي، يتم استخدام المقايسات المختبرية المؤكدة، مثل ير و ير في الوقت الحقيقي، للتحقق من وجود البلوتونيوس M في المستعمرات المشتبه بها. في حين أن هذه الأساليب دقيقة

ومحددة، فهي تستغرق وقتا طويلا وكثيفة العمالة. هنا، ونحن تقرير التنمية

من طريقة نانوديانوستيك اللونية خالية من التسمية للكشف المباشر من أونامبليفيد

M البلوتونيوس باستخدام الجسيمات النانوية الذهب غير معدلة. في ظل الظروف المناسبة، و

تحقيقات الحمض النووي هجين مع تسلسل الهدف التكميلي في الحمض النووي العينة،

مما أدى إلى تجميع الجسيمات النانوية الذهب وما يصاحب ذلك من اللون الأحمر إلى اللون الأزرق التغيير، الذي لوحظ بصريا. الفحص يمكن الكشف عن عدد قليل من 25 نسخة من

M البلوتونيوس جدار الخلية المرتبطة بروتياز الجين في غضون 20 دقيقة. وكانت نتائج الفحص في 100 في المائة يتفق مع الوقت الحقيقي ير إيجابية وعينات ير السلبية. لنا

وأظهرت الدراسة أن الفحص القائم على الجسيمات النانوية الذهب هو أداة محددة وحساسة

للكشف السريع عن البلوتونيوس M.

A novel gold nanoparticles-based assay for
rapid detection of Melissococcus plutonius, the
causative agent of European foulbrood

M. Saleh, H. Soliman, H. Sørum, A. K. Fauske, M. El-Matbouli

Papers A novel gold nanoparticles-based assay for rapid detection of Melissococcus plutonius, the causative agent of European foulbrood
European foulbrood (EFB) is a severe bacterial brood disease of honey bees (Apis mellifera)
caused by Melissococcus plutonius. Diagnosis of EFB in the field is based on visual inspection
of brood-combs and detection of diseased larvae. However, symptoms of EFB may be easily
obscured by other diseases or abnormalities in the brood, making definitive diagnosis
difficult. Hence, confirmatory laboratory assays, such as PCR and real-time PCR, are used to
verify the presence of M plutonius in suspected colonies. While these methods are accurate
and specific, they are time consuming and labour intensive. Herein, we report development
of a label-free colorimetric nanodiagnostic method for direct detection of unamplified
M plutonius DNA using unmodified gold nanoparticles. Under appropriate conditions, the
DNA probes hybridised with their complementary target sequences in the sample DNA,
which resulted in aggregation of the gold nanoparticles and a concomitant red to blue colour
change, which was observed visually. The assay could detect as few as 25 copies of the
M plutonius cell wall-associated protease gene within 20 minutes. The assay results were
in 100 per cent concordance with real-time PCR-positive and PCR-negative samples. Our
study demonstrated that the gold nanoparticles-based assay is a specific and sensitive tool
for rapid detection of M plutonius.